Evergreen雌酮酮酶联免疫试剂盒采用竞争酶标免疫分析法定量检测牛奶和奶牛血清、血浆中的雌酮含量。本酶联免疫吸附测定试剂盒运用竞争抑制酶标免疫分析法定量测定牛奶中雌酮含量。试剂盒中包含有96次检测所需的酶联免疫试验试剂。
 

实验原理

本试剂盒利用竞争性酶联免疫法。利用抗原(存在于标准品、质控和样本中)和酶标抗原(共轭)竞争结合微孔板上的抗体位点。清洗未结合的抗原，加入底物，再加入终止液结束酶反应。酶标仪读取吸光值，显色的强度与样品中雌酮的浓度成反比。对比标准曲线可以直接读取样品中雌酮的含量。
 

试剂盒组成

1) 预包被板：12x8孔（可拆分），96孔，微孔中包被有兔抗雌酮抗体。
2) 雌酮-生物素（Estrone-Biotin）浓缩液（100倍）。
3) 酶联物（Avidin-HRP）浓缩液（100倍）：每瓶200?l，辣根过氧酶标记的抗生物素蛋白。
4) 标准品：6支
5) 质控：可直接使用，1支，0.5ml。是确定浓度的雌酮溶液，标签上标记有检测的预期值和范围。
6) 洗液浓缩液-10倍：每瓶50ml。
7) 分析缓冲液：可直接使用，每瓶15ml。
8) 底物液：每瓶16ml，TMB（四甲基联苯胺）。
9) 终止液：每瓶6ml，1M的H2SO4。

注意事项

1) 严格按照说明书说明操作。
2) 要使用蒸馏水或去离子水用于稀释或复原。
3) 为了减少接触潜在有害物质，使用试剂和拿样本时应戴手套。 
4) 实验前要确定所有试剂和样品都恢复到室温，用前混匀。避免反复冻融试剂和样品。
5) 每次检测都要做标准曲线。
6) 每次检测都要做质控，并确定在置信区间内。
7) 所有取样体积必须按说明书进行。只有使用标准移液器和酶标仪才能获得理想的实验结果。
8) 操作过程尽量避免产生气泡，因为微孔中有气泡会影响OD值读数。
9) 底物液（TMB）对光敏感，应避光保存。
10) 不同批号的试剂请勿混合使用，不同反应板上的微孔请勿交换使用，就是同一批次的也不行。试剂盒运输或贮存的条件可能不同，但其结合特性仅有轻微的差异。
11) 根据国家生物有害物质安全条例，所有化学药品和准备/使用的试剂都应当做有害物质处理。

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